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Utilização do DELI-teste para avaliação da sensibilidade in vitro do Plasmodium vivax à Cloroquina em condições de campo no município de Tucuruí, Pará
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Américo, Ana Paula Larêdo |
| Copyright Year | 2007 |
| Abstract | O Estado do Para e um dos responsaveis pela maioria das notificacoes de malaria na Regiao Amazonica. Plasmodium vivax e a especie mais frequente e a avaliacao da sensibilidade do mesmo a cloroquina e essencial para verificar se tal droga mantem sua eficacia. Entretanto, isso nao era factivel em funcao da nao disponibilidade de metodologia de cultivo de curto prazo e da dificuldade de avaliacao da maturacao desse parasito. Recentemente, um sistema para cultivo de curto prazo de P. vivax foi introduzido, assim como uma metodologia de mensuracao (DELIteste) da maturacao/crescimento do parasito baseada na deteccao da enzima Lactato Desidrogenase do parasito (pLDH), permitindo estudos de sensibilidade dessa especie plasmodial aos antimalaricos. O objetivo desse trabalho foi entao avaliar o desempenho dessa metodologia para avaliar a quimiossensibilidade de P. vivax a cloroquina em condicoes de campo no municipio de Tucurui, no Estado do Para. Foram utilizados 44 pacientes positivos para malaria vivax, diagnosticados pelo exame de gota espessa, dos quais, apos consentimento, foram coletados 5mL de sangue. Uma suspensao de hemacias de cada paciente, preparada em meio de cultura especial (meios RPMI e Waymouth, soro AB+, hematocrito de 1,8%), foi colocada em cultivo in vitro de curto prazo (48 horas), a 37°C e microaerofilia, frente a uma gama de concentracoes (2,34-600ng/mL) de cloroquina. As placas foram entao congeladas e, posteriormente, os parasitos foram lisados por congelamento e descongelamento, liberando a pLDH. A mensuracao da pLDH foi feita por ELISA-sanduiche (DELI-teste), utilizando como anticorpos de captura os monoclonais 6C9 (anti-pLDH de Plasmodium) e 11D (anti-LDH de P. vivax) e como anticorpo de deteccao o monoclonal 19G (anti-pLDH de Plasmodium). Os valores de densidade otica obtidos permitiram, na maioria dos casos, tracar curvas de sensibilidade a droga e o consequente calculo da concentracao inibitoria de 50% (IC50). Do total de amostras, 53,8% apresentaram melhores curvas com o monoclonal 11D e 46,1% com o monoclonal 6C9. Das 44 amostras, 26 (59,2%) permitiram tracar curvas interpretaveis de sensibilidade a cloroquina. O rendimento de 59% pode ser considerado satisfatorio em funcao da conhecida dificuldade de se cultivar P. vivax in vitro, e das precarias condicoes de infra-estrutura para realizacao das culturas. Doze (46,2%) dessas 26 amostras apresentaram IC50 superior ao limiar de 100nM, sendo consideradas resistentes. Esse elevado percentual de amostras com perda e sensibilidade a cloroquina e preocupante e indica que esse tipo de avaliacao deve ser continuada e estendida a outras localidades para se ter uma caracterizacao mais clara dessa situacao. O DELIteste e o unico capaz de avaliar a resistencia in vitro do P. vivax e sua utilizacao em condicoes de campo pode contribuir para direcionar estrategias terapeuticas para malaria em nosso Pais. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | http://repositorio.ufpa.br/jspui/bitstream/2011/3731/1/Dissertacao_UtilizacaoDelitesteAvaliacao.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
