Loading...
Please wait, while we are loading the content...
Similar Documents
Vers l’identification des mécanismes moléculaires impliqués dans la galloylation des proanthocyanidines chez la vigne
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Bontpart, Thibaut |
| Copyright Year | 2015 |
| Abstract | Parmi les metabolites secondaires impliques dans la qualite du raisin et du vin, les tanins condenses ou proanthocyanidines (PAs) jouent un role majeur, en particulier dans l'astringence et la stabilite de la couleur du vin. Ces molecules sont egalement impliquees dans la defense des plantes contre des stress biotiques et abiotiques. En outre, les effets benefiques des PAs pour la sante humaine sont bien documentes. Les PAs de la vigne ont la particularite d’etre esterifiees avec de l’acide gallique. Une reaction d’acylation appelee galloylation est responsable de cette modification. Les etudes montrent que la galloylation influence les proprietes œnologiques et pharmacologiques des PAs. Dans la baie de raisin, les PAs sont synthetises dans les premiers stades de developpement, principalement dans les pellicules et les pepins. Un nombre relativement faible d'etapes enzymatiques sont necessaires pour la biosynthese de la structure de base de ces metabolites et les genes correspondants sont aujourd'hui largement connus chez les plantes modeles, y compris chez la vigne. Cependant, les mecanismes moleculaires impliques dans les etapes finales, y compris la galloylation, ne sont encore que partiellement connus. Des resultats anterieurs obtenus apres la recherche de QTL influencant la composition du raisin, et en particulier le taux de galloylation des PAs, et des etudes transcriptomiques apres surexpression de facteurs de transcription regulant la biosynthese de la voie des PAs, ont permis l'identification de genes potentiellement impliques dans ces etapes. Des genes de shikimate deshydrogenase (SDH) ont ete identifies. Ces genes interviendraient en amont, pour la biosynthese de l'acide gallique. Trois glucosyltransferases ainsi identifiees et deja caracterisees au laboratoire sont impliquees dans la biosynthese de l'ester de glucose de l'acide gallique (β-glucogalline), qui servirait d'intermediaire pour la galloylation des PAs. Ces methodes de criblage ont egalement permis d’identifier 2 acyltransferases de type serine carboxypeptidase, nommees glucose acyltransferases (GATs) qui seraient capables de catalyser la derniere etape de galloylation: le transfert de l'acide gallique depuis la β-glucogalline sur les PAs. Le premier objectif de cette these a ete de determiner la fonction des SDHs codees par les genes de vigne. Certaines SDHs recombinantes produites de facon heterologue chez E.coli ont la capacite a produire de l'acide gallique in vitro. Leur niveau d’expression au cours du developpement et dans differents tissus de la baie a egalement ete etabli. Les resultats obtenus in vitro sont etayes par le profil metabolique (acide gallique, β-glucogalline et PAs) de hairy-roots de vigne transformees avec un gene de SDH. Le second objectif de cette these a ete de valider la fonction des GATs par expression transitoire dans des feuilles de tabac et des tests enzymatiques in vitro. La transformation transitoire de feuilles de vigne avec les GATs a permis de moduler la concentration d’esters phenoliques et nomment des flavan-3-ols galloyles in planta. L’etude de ces genes a ete etendue aux plantes vasculaires par des analyses phylogenetiques et a permis d’identifier des motifs peptidiques potentiellement impliques dans les mecanismes etudies et refletant la sub-fonctionnalisation de certains genes. Ce travail a fourni des informations sur les bases genetiques et les mecanismes moleculaires impliques dans la biosynthese de l'acide gallique et son transfert en deux etapes sur les flavan-3-ols (galloylation). De nouvelles hypotheses sur l'intervention de differents transporteurs et la nature des molecules transportees pourront etre formulees. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | http://www.supagro.fr/theses/extranet/15-0040_Bontpart.pdf |
| Alternate Webpage(s) | https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01404867/document |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
