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Etablierung von ES-Zelllinien zur vorhersagbaren autoregulierten Expression von Transgenen in Mäusen
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Wodarczyk, C. |
| Copyright Year | 2004 |
| Abstract | Die meisten derzeit angewandten Verfahren zur Etablierung transgener Mause erfordern ein weitlaufiges Screening von Tieren, da die zufallige Integration eines Transgens zu einer, vom Integrationsort abhangigen und daher nicht vorhersagbaren Transgen-Expression fuhrt. Die Wiederverwendung von geeigneten Genorten in ES-Zellen zur Etablierung transgener Mause scheint daher sinnvoll. Zu diesem Zweck wurden autoregulierte Expressionskassetten, basierend auf dem TetOff-, TetOn-, E.REXOff- und PIPOff-System, konstruiert, die eine Identifizierung regulierbarer Genorte im Mausgenom und deren Wiederverwendung fur eine vorhersagbare, regulierte Expression eines beliebigen Transgens ermoglichen sollten. Die Expressionskapazitaten der Systeme wurden in verschiedenen ES-Zelllinien analysiert. Dabei zeigte sich, dass das TetOn-System ein sehr hohes, das TetOff-System jedoch nur ein niedriges Expressionspotential besitzt. In NIH3T3- und in in vitro differenzierten Zellen wurden jedoch hohe Expressionen mit dem TetOff-System erzielt. Auf der Basis Flp-vermittelter Rekombination wurde eine Kassettenaustauschstrategie entwickelt, die eine Integration eines Transgen-exprimierenden Konstruktes in bereits charakterisierte Genorte, die mit heterospezifischen FRT-Sites markiert sind, erlauben sollte. Diese Strategie wurde in NIH3T3-Zellen getestet und fuhrte zu Zelllinien mit homogener, vorhersagbarer Transgen-Expression. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://publikationsserver.tu-braunschweig.de/servlets/MCRFileNodeServlet/dbbs_derivate_00001561/Document.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
