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Mise Au Point D'un Format De Puces a Cellules Pour L'analyse Phenotypique a Haut-contenu
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Reboud, Julien |
| Copyright Year | 2006 |
| Abstract | Aujourd'hui la recherche en biologie dispose d'une masse d'informations genomiques considerable qu'il faut comprendre fonctionnellement pour faire emerger de nouveaux concepts, qui formeront le berceau de nouvelles therapies. Ces etudes mettent en jeu des mecanismes controles a l'echelle moleculaire et necessitent le traitement d'informations a haut-debit et de maniere parallele. Les travaux pluridisciplinaires presentes ont permis de mettre au point une technologie miniaturisee de culture de cellules en gouttes matricees sur supports solides, pour tester l'action des molecules sur le comportement de cellules. Apres avoir mis au point un demonstrateur macroscopique valide par des transfections de molecules nucleiques, nous avons developpe un protocole de fabrication de substrats miniaturises capable de maintenir 100 nano-gouttes par cm² a l'aide d'un differentiel de tension de surface. Un robot de dispense de pico-gouttes a ete integre pour realiser les gouttes de culture cellulaire de maniere automatique. Le comportement des cellules au sein des gouttes est evalue par microscopie en fluorescence a haut-contenu apres fixation. Chaque cellule de chaque goutte est caracterisee par des dizaines de parametres de maniere individuelle. Cette nouvelle approche analytique a ete appliquee dans le cadre d'un projet multipartenaire de criblage de siRNA visant a etudier l'impact de genes sur la chimioresistance de glioblastomes. Par ailleurs nous avons montre l'utilisation de la spectrometrie de masse comme methode de phenotypage multiparametrique. Cette technologie de puce a cellules est particulierement adaptee a l'etude a haut-debit des comportements fins de cultures cellulaires. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://tel.archives-ouvertes.fr/file/index/docid/92909/filename/06-06-29_puces_a_cellules_en_gouttes_JR_v1-2.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
