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Caractérisation fonctionnelle de gènes impliqués dans le développement du pollen chez Arabidopsis thaliana
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Lallemand, Benjamin |
| Copyright Year | 2012 |
| Abstract | Le polymere de sporopollenine est un constituant majeur de l’exine, la partie externe de la paroi du grain de pollen. Son exceptionnelle resistance permet de les proteger des stress environnementaux de nature mecanique ou chimique. Il constitue une des clefs de la colonisation du milieu terrestre par les plantes. Au cours de ma these, j’ai caracterise deux Polyketide Synthases (PKS-A et PKS-B) et deux Tetraketide α-Pyrone Reductases (TKPR1 et TKPR2) d’Arabidopsis thaliana. Par immunolocalisation, hybridation in situ et des etudes de microscopie j’ai montre que ces proteines intervenaient dans la synthese de la paroi pollinique. In vitro, les deux PKS catalysent la condensation de 2 ou 3 molecules de malonyl-CoA sur differents esters de CoA d’acide gras pour former les tri et tetraketide α-pyrones correspondants, substrat de TKPR1 et TKPR2. In vitro, celles-ci reduisent la fonction cetone en alcool secondaire formant des composes hydroxyles, precurseurs du polymere de sporopollenine. Dans les cellules du tapetum, la synthese des monomeres de sporopollenine se deroule en quelques heures seulement. Par immunodetection et en fusionnant les proteines a la GFP, j’ai montre que ces enzymes se trouvent a la surface du reticulum endoplasmique a l’exception de TKPR2. Des experiences de HIS-pull-down, de FLIM-FRET et de double hybride nous ont ensuite permis de suggerer que ces proteines forment un metabolon. L’identification de genes homologues dans de nombreuses especes vegetales y compris une mousse revele que nous avons identifie une voie metabolique tres ancienne conservee au sein des angiospermes. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00804448/document |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |