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Untersuchungen zur Charakterisierung eines Purinozeptors und zur Expression von Komplementfaktoren des klassischen Aktivierungsweges in humanen Praeadipozyten
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Kramheller, Christian |
| Copyright Year | 2001 |
| Abstract | Im Mittelpunkt dieser Arbeit stehen mit den humanen Praeadipozyten die fibroblastenartigen Vorlauferzellen reifer Adipozyten, in welchen mit der Aromatase (Cytochrom P-450Arom) das Schlusselenzym der Estrogenbiosynthese lokalisiert ist. Mit der pharmakologischen Klassifizierung eines Purinozeptors auf humanen Praeadipozyten, der den potenzierenden Effekt von ATP bei der Induktion von Aromatase durch Cortisol und PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) vermittelt, als Ausgangspunkt konnte die cDNA fur die P2X1-Rezeptoruntereinheit uber den gesamten kodierenden Bereich nachgewiesen werden. Versuche zur weiteren Charakterisierung des Purinozeptors auf molekularer Ebene mittels Yeast Two Hybrid Assays scheiterten. Unabhangig hiervon wurden humane Praeadipozyten als Expressionsort von Komplementfaktoren des klassischen Aktivierungsweges identifiziert. Die Faktoren C1s, C1r, C2 und C4 konnten auf mRNA-Ebene nachgewiesen werden, wahrend der Komplementfaktor C1q nicht gefunden wurde. Die Serinproteasen C1s und C1r konnten zudem durch Western-Blot-Technik sowohl im Zellysat als auch in sezernierter Form im zugehorigen Zellkulturuberstand nachgewiesen werden, was ihre funktionelle Expression nahelegt. Zur Untersuchung der differenzierungsabhangigen Expression der in humanen Praeadipozyten nachweisbaren Komplementfaktoren wurden semiquantitative RT-PCRs etabliert. Die Resultate belegen einen deutlichen Ruckgang der Genexpression der Komplementfaktoren C1s und C1r wahrend der Differenzierung primarkultivierter humaner Praeadipozyten, der bei der Untersuchung von entsprechenden Zellysaten durch Western-Blot-Technik Bestatigung fand. Durch Western-Blot-Technik konnte zudem gezeigt werden, dass sich der dedifferenzierende Effekt von TNF (Tumor-Nekrose-Faktor) auf reife Adipozyten in einer Steigerung der Expressions- und Sekretionsrate fur die Komplementfaktoren C1s und C1r niederschlagt. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://epub.uni-regensburg.de/9891/1/winprom.pdf |
| Alternate Webpage(s) | http://epub.uni-regensburg.de/9891/1/winprom.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
