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Méthodes analytiques pour la détection de phénomènes biologiques de sécrétion à l'échelle de la cellule unique
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Meunier, Anne |
| Copyright Year | 2011 |
| Abstract | De par leur excellente resolution spatiale et leurs proprietes particulieres, les ultramicroelectrodes (UME) constituent des outils de choix pour l'etude de mecanismes biologiques de secretion a l'echelle de la cellule unique. En configuration " synapse semi-artificielle ", du fait de la faible distance qui separe la cellule emettrice de l'UME, les molecules sont liberees dans un faible volume, induisant alors des concentrations suffisamment elevees pour etre detectables par electrochimie. Ainsi, les UME offrent la possibiIite de mesurer des flux, meme infimes, de molecules electroactives en temps reel. Cette technique analytique a ete utilisee, completee ou adaptee afin d'etudier deux phenomenes biologiques : l'exocytose vesiculaire et le stress oxydant cellulaire. L'analyse amperometrique de l'exocytose, mecanisme implique dans la communication cellulaire, permet l'etude quantitative de la cinetique de liberation des molecules intravesiculaires liberees dans le milieu extracellulaire. L'UME, placee dans le milieu exterieur, n'apporte pas d'information quant au statut des vesicules avant la fusion. Pour completer ces informations, nous avons developpe, par des techniques de microfabrication, un microsysteme constitue d'electrodes conductrices et transparentes d'ITO permettant un couplage des detections amperometrique et optique (microscopie TIRF) pour l'etude de la secretion des cellules BON BC21. L'amperometrie a quatre potentiels constants, utilisee au laboratoire pour la detection des ROS/RNS liberees par les macrophages, cellules du systeme immunitaire, necessite un grand nombre d'experiences pour s'affranchir de la variabilite cellulaire et des differences de sensibilite des UME. Afin de reduire considerablement le temps d'experience, nous avons developpe un microsysteme constitue de quatre chambres de mesure, chacune contenant un jeu de trois electrodes. Ces quatre chambres permettront, a terme, le suivi et la detection simultanee en temps reel des variations de production de H2O2, ONOO-, NO* et NO2- liberees par une cellule. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00858915/document |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
