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Thérapie génique non virale de variants du gène du récepteur soluble de type I du TNF-alpha humain. Application à différents modèles de pathologies inflammatoires
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Bloquel, Carole |
| Copyright Year | 2005 |
| Abstract | Le TNF-α est une cytokine pro-inflammatoire jouant un role deletere dans de nombreuses pathologies. Nous nous sommes interesses a l'inhibition du TNF-α a l'aide de variants du recepteur soluble de type I du TNF-α (hTNFR-Is) administres par therapie genique non virale. Trois variants ont ete etudies: un monomere hTNFR-Is, correspondant au recepteur soluble physiologique, une proteine chimerique hTNFR-Is/mIgG1, dont l'efficacite par administration proteique est reconnue, et une forme dimerique obtenue par association de deux fragments hTNFR-Is a l'aide d'un espaceur polyglycine. La vectorisation des plasmides codant ces variants a ete etudiee par differentes voies afin d'obtenir un effet systemique (electrotransfert intramusculaire, greffe de cellules autologues), ou un effet local (electrotransfert intra-articulaire (genou de souris), electrotransfert intra-oculaire). L'electrotransfert intramusculaire permettait d'obtenir une expression de proteine a long terme (superieure a 6 mois) et dose-dependante. La proteine chimerique etait tres stable dans la circulation, et etait secretee a un taux eleve. Cette procedure n'induisait pas de reponse immune contre la proteine transgenique. Nous avons demontre l'obtention, par electrotransfert intra-articulaire, d'une expression dosedependante du transgene durant deux semaines. Le passage de la proteine dans la circulation etait faible, ce qui etait l'objectif de cette approche locale. Aux fortes doses, une reponse immune contre la proteine chimerique etait observee. Nous avons montre la faisabilite de l'electrotransfert dans un muscle lisse, le muscle ciliaire de l'œil. L'expression obtenue etait uniquement localisee dans le muscle cible, et la procedure etait sure (pas d'inflammation ni de dommages observables). L'expression du transgene etait superieure a un mois, sans passage de la proteine dans la circulation. L'electrotransfert intramusculaire de variants du hTNFR-Is etait efficace (forme chimerique principalement) dans un modele de polyarthrite rhumatoide (arthrite experimentale au collagene) sur les signes cliniques et histologiques de la maladie, par un unique electrotransfert a l'apparition des signes cliniques de la maladie. La comparaison de ce traitement a l'injection repetee de proteine recombinante illustrait la potentialite d'une approche par therapie genique, de part son efficacite a long terme. Les approches locale et cellulaire restent a tester dans ce modele. L'electrotransfert intramusculaire de plasmide codant les hTNFR-Is ne permettait pas d'ameliorer la recuperation des fonctions motrices apres un traumatisme crânien, dans un modele murin, meme si la proteine etait detectee dans le cerveau, et capable d'inhiber le TNF-α. Ces resultats sont cependant tres preliminaires. L'electrotransfert intra-oculaire du plasmide codant la forme chimerique hTNFR-Is/mIgG1 permettait d'inhiber efficacement les signes cliniques et histologiques dans un modele experimental d'uveite (uveite experimentale aux endotoxines). Nos resultats mettent en evidence l'efficacite de l'electrotransfert pour delivrer un gene therapeutique et obtenir une production locale ou systemique (selon la strategie utilisee) de proteine therapeutique. Nos resultats illustrent le potentiel de nouvelles cibles (articulation, muscle lisse de l'œil) pour cette technologie, ce qui est encourageant pour l'application future de l'electrotransfert a d'autres tissus/organes cibles et a d'autres pathologies. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://pastel.archives-ouvertes.fr/pastel-00001807/document |
| Alternate Webpage(s) | https://pastel.archives-ouvertes.fr/file/index/docid/500209/filename/these_c_bloquel.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
