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Développement d'un biocapteur bactérien pour la détection de métaux lourds
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Riether, Karl Bernhard |
| Copyright Year | 2001 |
| Abstract | A l'issue du criblage d'une banque de fusions transcriptionelles avec le gene lacZ d'Escherichia coli, un gene dont l'expression est induite par la presence de mercure a ete isole. Ce gene, nomme zntA, code pour une ATPbase de type P, qui transporte de metaux lourds (cadmium, plomb zinc) vers l'exterieur de la cellule, et constitue donc un systeme de resistance vis a vis de ces composes. Nous avons pu observer que l'expression de la fusion zntA::lacZ est induite en presence de composes inorganiques de cadmium, de mercure, de plomb et de zinc, et que cette reponse est dose-dependante. Afin de creer une souche rapporteur luminescente, le promoteur de zntA a ete amplifie par PCR et clone dans le plasmide pUCD615, en amont des genes rapporteurs luxCDABE de Vibrio fischeri. Le plasmide resultant, pZNT::lux, confere la production de lumiere a differentes souches d'E. Coli, lorsque les cellules sont exposees aux metaux lourds. A l'aide de la souche rapporteur obtenue, nous avons developpe un procede de mesure luminometrique permettant la detection de metaux lourds. Les conditions de mesure ont ete optimisees en modifications de parametres tels que le milieu de culture, la phase de culture bacterienne, la densite cellulaire et le pH afin d'obtenir un protocole de mesure rapide et sensible. Le bioessai permet la detection de cadmium, de mercure, de plomb et de zinc a partir de concentrations respectives de 0,01 µM, 0,1µM, et 0,3 µM. L'interet principal de l'approche est qu'elle permet d'evaluer la fraction biodisponible de metaux lourds, meme dans des matrices complexes tels que des sols contamines et leurs lixiviats. Malgre le fait que de nombreux facteurs environnementaux peuvent influencer la reponse luminescente et qu'il est difficile de distinguer les proportions relatives de differents inducteurs dans un melange, cette technique analytique peut constituer un outil precieux pour une mesure semi-quantitative de la presence de metaux lourds dans des echantillons naturels |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://hal.univ-lorraine.fr/tel-01748961/document |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
