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In vitro und in vivo Charakterisierung von IFN beta exprimierenden Zellen mittels eines bicistronischen Fluoreszenz-Reporter-Mausmodells
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Dresing, Philipp |
| Copyright Year | 2011 |
| Abstract | Typ I Interferone bilden eine Klasse von Sequenzhomologen Zytokinen, zu der multiple IFNs und ein einziges, im Allgemeinen initial exprimiertes IFN gerechnet werden. Typ I Interferone sind essentiell fur die Etablierung einer effektiven antiviralen Immunantwort und besitzen pleiotrope immunregulatorische Funktionen. Im Gegensatz zur Wirtsprotektion bei Virusinfektionen ist ihr Einfluss bei bakteriellen Erkrankungen sehr ambivalent. So ist die Expression von Typ I Interferonen nach Infektion mit dem intrazellularen Modellbakterium Listeria monocytogenes fur den Wirt von Nachteil und induziert eine erhohte Bakterienlast in infizierten Organen sowie eine gesteigerte Sterblichkeitsrate. Sehr viele Zelltypen besitzen die molekulare Grundausstattung zur Expression von IFN. Welche Zellen aber diese Zytokinantwort in vivo initiieren ist weitestgehend unbekannt. In der vorliegenden Arbeit wurde daher ein biscistronisches IFN/YFP Reportermausmodell genutzt, das die Identifizierung und eingehende in vitro und in vivo Charakterisierung IFN produzierender Zellen auf zellularer Ebene durch eine Koexpression von YFP ermoglicht. Durch Stimulation von in vitro aus Knochenmarkszellen differenzierten Makrophagen und Dendritischen Zellen (DCs) mit definierten mikrobiellen Bestandteilen (PAMPs) konnte belegt werden, dass unterschiedliche PAMP Kombinationen zelltypspezifisch zur entsprechend optimalen IFN Produktion fuhren. Nach in vivo Stimulation mit poly(I:C) und CpG 1668 wurde ein unterschiedliches Lokalisierungs- und Migrationsverhalten der jeweiligen IFN produzierenden Zellen beobachtet. Wahrend poly(I:C) IFN in konventionellen (c)DCs induzierte, die von der roten Pulpa uber die Marginalzone in die weise Pulpa der Milz relokalisierten, war eine Subpopulation plasmazytoider (p)DCs nach CpG Injektion fur die Expression des Zytokins verantwortlich. Durch eine Mikroarray basierte Transkriptom Analyse von ex vivo FACS sortierten IFN+ und IFN- pDCs wurde gezeigt, dass eine umfangreiche differentielle Gentranskription zwischen den beiden Populationen vorlag. Insbesondere liesen die in IFN+ pDCs starker exprimierten Chemokine und Interleukine auf eine spezifische Funktion der IFN-Produzenten bei der Rekrutierung von Effektorzellen sowie der Induktion der zellularen adaptiven Immunantwort schliesen. Die funktionelle Analyse der IFN exprimierenden Zellen im etablierten Infektionsmodell der murinen Listeriose zeigte, dass anders als bisher vermutet, nicht Makrophagen, sondern eine hochaktivierte Effektorpopulation von Antigenprasentierenden Zellen fur die IFN Expression in der Milz verantwortlich ist. Diese Zellen exprimierten uber IFN hinaus im hochsten Mase iNOS und TNF und waren in der Lage, naive T-Zellen zu primen. Daher konnten diese Zellen eindeutig als neue Subpopulation von TNF und iNOS produzierenden DCs (Tip-DCs) identifiziert werden. Uberraschenderweise zeigte ein adoptiv-er Transfer von IFN+ Tip-DCs in IFN defiziente Mause, dass diese Zellpopulation keinen ungunstigen Effekt auf den Wirt ausubte, sondern im Gegenteil durch eine Reduktion der Bakterienlast in infizierten Organen protektiv wirkte. Trotz der Expression des fur den Wirt in dieser Situation ungunstigen IFN uberwiegt die durch iNOS und TNF aktivierte bakterizide Effektorfunktion. Somit konnten in dieser Arbeit erstmals die Initiatorzelltypen der Typ I IFN Antwort in vivo auf zellularer Ebene identifiziert und durch die eingehende Charakterisierung dieser Zellen ein tieferes Verstandnis fur ihre immunologische Funktion erreicht werden. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DerivateServlet/Derivate-18072/Dissertation%20P%20Dresing%20pdfA%20aus%20Word.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
