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Generación de vectores de expresión para el análisis funcional de secuencias reguladoras del Virus Huasteco del Chile
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Castañón, Gómez Guadalupe, Rosa |
| Copyright Year | 2004 |
| Abstract | ..........................................................................................11 Introducción.....................................................................................12 Organización genómica de los geminivirus......................................13 Regulación de los genes “tempranos” en begomovirus......................15 Regulación de los genes “tardíos”: descubrimiento de un silenciador viral............................................17 Delimitación de los elementos que responden a TrAP.......................19 Mecanismos de acción de TrAP....................................................22 Algunas interrogantes en el campo de la regulación de los genes tardíos en begomovirus.............................................23 Objetivos.........................................................................................25 Materiales y Métodos........................................................................26 Análisis de secuencias...............................................................26 Oligonucleótidos y plásmidos.......................................................26 Construcción y verificación de los vectores.....................................26 Aislamiento y manipulación enzimática del DNA..............................30 PCR.......................................................................................31 Rosa Gómez Castañón Tesis Maestría7 Resultados.......................................................................................32 A.Construcciones para delimitar el silenciador de PHV....................32 A.1Identificación de la región de PHV homóloga a la región silenciadora de TGMV...................................................................32 A.2 Obtención de los fragmentos de tamaño decreciente de la potencial región silenciadora.....................................................32 A.3 Modificación del vector pCP693GUS...............................................37 A.4 Generación de vectores de expresión transitoria con fragmentos de la región Sil de PHV................................................39 A.5Generación de vectores de expresión transitoria con promotores hibridos TGMV-PHV.....................................................41 B.Vectores para evaluar promotores sintéticos con múltiples copias del CLE....................................................... 42 B.1Diseño de oligonucleótidos con tres copias del CLE............................42 B.2Obtención de los vectores binarios pBI3CLE46S y pBI3CLE90S............42 B.3Obtención del vector binario pBI6CLE46S.........................................44 B.4Obtención de los vectores de expresión transitoria pBS3CLE46S, pBS3CLE90S y pBS6CLE46S....................................44 C.Delimitación teórica de potenciales elementos reguladores de promotores tardíos, y generación de vectores para caracterizarlos experimentalmente................................................................45 C.1Identificación de “módulos complejos conservados” en los promotores CP y V2.....................................................................................45 C.2Construcciones para el análisis funcional de CMAs que contienen CLEs.........................................................................................56 C.2.1Obtención de los vectores binarios pBI46S-CLE/G, pBI46S-T/CLE, pBI90S-CLE/G y pBI90S-T/CLE......................56 C.2.2Obtención de los vectores de expresión transitoria pBS46S-CLE/G, pBS46s-T/CLE, pBS90S-CLE/G y pBS90S-T/CLE.................................................................57 Discusión........................................................................................60 Referencias......................................................................................66 Rosa Gómez Castañón Tesis Maestría- |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://repositorio.ipicyt.edu.mx/bitstream/handle/11627/223/GomezCastanon.pdf?isAllowed=y&sequence=1 |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
