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Aislamiento y caracterización parcial de bacteriófagos de salmonella spp con potencial aplicación en el biocontrol sobre superficies
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Santiago, Rodrigo Hernández |
| Copyright Year | 2019 |
| Abstract | La inocuidad alimentaria es un tema amplio y relevante que impacta directamente en todos los segmentos de la sociedad, involucra productores, desarrolladores, innovadores, consumidores y gobierno, ademas de diversos sectores como la industria, la ingenieria y hasta la educacion. Sin embargo, las nuevas tecnologias en la cadena de produccion provocan que esta sea mas larga y compleja. Las enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) causan alta morbilidad y varios casos de mortalidad. Entre los agentes infecciosos mas comunes se encuentran Salmonella spp, Campylobacter spp, Escherichia coli, Clostridium perfringens, Vibrio parahaemolyticus, Clostridium botulinum, Listeria monocytogenes y Staphylococcus aureus. Los bacteriofagos o fagos son virus bacterianos especificos de una celula huesped, en la cual se multiplican invadiendo su maquinaria de material genetico. Son los sistemas biologicos mas abundantes del planeta, se encuentran en el medio ambiente y se introducen y conviven en la flora intestinal de otros seres cuando estos ingieren diversos alimentos, ya sean de tipo animal o vegetal. El objetivo del presente trabajo fue aislar y probar la especificidad de una serie de bacteriofagos de Salmonella spp a partir de aguas residuales para lo cual se utilizaron muestras de agua recolectadas de diferentes localidades del area metropolitana de Monterrey, N. L., Mexico. La purificacion de bacteriofagos se llevo a cabo mediante la tecnica de agar doble capa (ADC) hasta obtener placas liticas uniformes y se usaron diferentes cepas de referencia de Salmonella como cultivos indicadores. Se aislaron un total de 15 bacteriofagos putativamente distintos, de los cuales, al pasar las pruebas de replicacion, solo uno logro mantener la capacidad litica. Se selecciono y purifico para realizar pruebas in vitro especificas para Salmonella (ATCC 19430). Se utilizo una concentracion de bacteriofagos de 1x1012 UFP/ml para analizar al bacteriofago mediante su morfologia por microscopia electronica, la cual se identifico como miembro de la familia Siphoviridae. Asi mismo, se probaron los bacteriofagos contra Salmonella in situ en discos de acero que simulan las superficies de trabajo, y para analizar el efecto de la infeccion del bacteriofago sobre Salmonella en los discos de acero inoxidable se utilizo el microscopio de epifluorescencia. Para el conteo de bacteriofagos se utilizo los metodos LIVE/DEAD y el recuento en placa de agar, la correlacion entre ambos metodos fue de R2=0.82. Para finalizar, para evaluar la efectividad del bacteriofago MRH6 que resulto litico en nuestro ensayo, se procedio a dar las condiciones necesaria para la formacion del biofilm de Salmonella sobre superficies de acero inoxidable. El bacteriofago MRH6 fue capaz de disgregar los biofilms a temperatura ambiente. Las mayores reducciones de Salmonella en un menor tiempo se obtuvieron con concentraciones de fago mayores a 1x108 UFP/mL. El metodo de cultivo mostro reducciones del patogeno a niveles indetectables; sin embargo, la tincion vital revelo la presencia de celulas viables (coloracion verde), que podria representar un riesgo de contaminacion cruzada, estas pudieran tambien presentarse por la presencia de material organico. Este trabajo con un bacteriofago puede proporcionar una medida adyuvante para controlar la contaminacion de superficies de acero inoxidable con biofilms de Salmonella. La DEM resulto ser una buena herramienta para evaluar rapida y adecuadamente por observacion y posterior analisis el efecto de los bacteriofagos. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://ddd.uab.cat/pub/tesis/2019/hdl_10803_667337/rhs1de1.pdf |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
