Développement d'un support d'extraction sélective à base d'aptamères : synthèse, caractérisation et application à des matrices complexes

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Madru, Benjamin
Copyright Year	2010
Abstract	L'analyse de composes a l'etat de traces dans des echantillons complexes tels que les fluides biologiques, les matrices environnementales ou les denrees alimentaires necessite une etape de purification avant analyse afin de limiter la presence d'effets de matrice. Les supports conventionnels d'extraction sur phase solide, bien qu'etant tres efficaces pour preconcentrer l'echantillon, conduisent souvent a la co-extraction de composes interferents. Afin de pallier ce manque de selectivite, des supports selectifs fondes sur des mecanismes de reconnaissance moleculaire ont ete developpes. Les immunoadsorbants, reposants sur l'utilisation d'anticorps diriges contre l'analyte et immobilises sur un support solide, et les polymeres a empreintes moleculaires qui possedent des cavites specifiques complementaires d'une molecule empreinte, ont deja demontre un fort potentiel pour l'extraction selective de composes de matrices complexes. Un troisieme type de support d'extraction selective egalement fonde sur un mecanisme de reconnaissance moleculaire exploitant les proprietes des aptameres a ete developpe lors de cette etude. Les aptameres sont des oligonucleotides capables de fixer de maniere specifique une molecule avec une affinite comparable a celle des anticorps. Un aptamere selectionne pour reconnaitre la cocaine a ete choisi comme aptamere modele pour cette etude de faisabilite. Differents supports d'immobilisation ont ete evalues et les oligoadsorbants obtenus ont ete caracterises en termes de retention specifique et non specifique, de taux de greffage, et de capacite. La selectivite du support le plus performant en milieu pur a ensuite ete evaluee en realisant l'extraction de la cocaine de plasma et de sang. L'analyse chromatographique des extraits obtenus a conduit a des chromatogrammes depourvus de co-elutions, contrairement a ceux issus des traitements generalement employes, demontrant ainsi l'apport en purification de l'oligoextraction. Ce developpement a ensuite ete transpose avec succes a un autre aptamere, l'aptamere anti-ochratoxine A. L'oligoadsorbant obtenu s'est montre tres retentif, du fait de sa forte affinite, et a permis l'extraction selective de l'ochratoxine A du vin. Les resultats obtenus sont tres similaires a ceux obtenus avec un immunoadsorbant. De plus, les procedures d'extraction s'averent beaucoup plus simples a developper que pour les polymeres a empreintes moleculaires.
File Format	PDF HTM / HTML
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Language	English
Access Restriction	Open
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Resource Type	Article