Etude de mécanismes de l'endocytose chez Dictyostelium discoideum. Caractérisation des effets inhibiteurs de la caféine et de la cycloheximide. Analyse du pH endosomal.

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Gonzalez-Hernandez, Carlos
Copyright Year	1991
Abstract	Les voies d'endocytose chez l'amibe Dictyostelium discoideum ont ete explorees en etudiant l'acidification des compartiments endocytaires et en caracterisant l'action de la cafeine et de la cycloheximide, deux inhibiteurs qui ne modifient pas le metabolisme energetique de la cellule. Le dextran marque par l'isothiocyanate de fluoresceine (FITC dextran) a ete employe comme sonde de phase fluide. Dictyostelium montre une internalisation de fluide plus active dans un milieu nutritif que dans un milieu non nutritif. Dans les deux cas, une cinetique biphasique est observee avec une premiere phase lineaire en fonction du temps, suivie d'un plateau qui correspond a l'equilibre dynamique entre l'entree et la sortie de fluide. Les cinetiques sont modelisables sur la base d'un compartiment endocytaire unique. L'activite pinocytaire diminue avec la temperature avec une energie d'activation de 27 kcal/mol. Le FITC dextran a ete utilise comme sonde de pH. Au plateau de pinocytose, le compartiment endosomal est a une valeur moyenne de pH 5,8 (+/- 0,2) qui est independante du pH extracellulaire. Les bases faibles et d'autres agents comme la monensine ou le carbonyl cyanide m-chloro phenylhydrazone, diminuent l'acidite du compartiment endosomal. La determination du pH endosomal pendant les phases initiales (t La cafeine inhibe de facon immediate toutes les activites endocytaires chez l'amibe Dictyostelium : la pinocytose de phase fluide, la phagocytose et la secretion des enzymes lysosomales. La cafeine est aussi un inhibiteur de la croissance axenique dans la meme gamme de concentrations que celles qui inhibent l'endocytose. D'autres methylxanthines, comme la theobromine, la theophylline ou la paraxanthine sont sans effet sur l'endocytose ou la croissance de Dictyostelium. L'hypothese pour expliquer l'effet inhibiteur de la cafeine est une perturbation de l'homeostasie du Ca2+ intracellulaire. La cycloheximide est un inhibiteur de la synthese proteique chez les eucaryotes. Apres une phase de latence d'environ 10 minutes, la cycloheximide bloque toutes les activites endocytaires chez l'amibe Dictyostelium. D'autres inhibiteurs de la synthese proteique des cellules eucaryotes qui possedent des modes d'action et des structures differents, tels que l'anisomycine, l'emetine, la pactamycine et la puromycine inhibent aussi l'endocytose. L'hypothese envisagee pour rendre compte de l'inhibition de l'endocytose par les inhibiteurs de la synthese proteique fait intervenir des mecanismes de reponse au stress.
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Language	English
Access Restriction	Open
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Resource Type	Article