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Régulation de l'adaptation de la bactérie Pseudomonas aeruginosa à son hôte : implication des métabolites du tryptophane
| Content Provider | Semantic Scholar |
|---|---|
| Author | Chaker, Hichem |
| Copyright Year | 2012 |
| Abstract | P. aeruginosa est un pathogene opportuniste capable d'infecter un large spectre d'hotes. Elle possede un vaste arsenal de facteurs de virulence. Le systeme de secretion de type III (SSTT) est un facteur de virulence majeur dont la regulation est complexe pour permettre une adaptation la plus precise possible de la bacterie au cours de l'infection. Nous nous sommes interesses a determiner le role potentiel de nouveaux acteurs de l'adaptation de P.aeruginosa au cours de l'infection. La porine OprF qui represente la proteine la plus abondante de la membrane externe de P. aeruginosa lui permettrait d'evaluer l'etat d'activation du systeme immunitaire de son hote afin d'adapter sa virulence. Chez P. aeruginosa, le tryptophane est le precurseur des kynurenines qui sont egalement produites par l'hote a partir du tryptophane et qui, dans ce dernier contexte, sont des immunomodulateurs. Peu ou pas d'etudes ont ete realisees pour mettre en œuvre un eventuel role d'immunomodulation ou dans la virulence des kynurenines bacteriennes. Dans un premier temps, nous nous sommes interesses a un signal anciennement decouvert au laboratoire et qui reprime l'expression du SSTT a haute densite bacterienne. Nous avons montre que ce signal exerce une regulation post-transcriptionnelle en plus d'une inhibition de la transcription des genes du SSTT. Le metabolisme du tryptophane et de l'anthranilate semble etre au cœur de ce processus de regulation. En inactivant des voies du catabolisme du tryptophane, nous avons montre que la production de ce signal depend partiellement de la voie des kynurenines mais ne depend pas ni des voies classiques du quorum sensing ni de l'operon phnAB, implique dans la synthese de l'anthranilate. Cependant, la voie des phenazines pourrait etre impliquee dans la production de ce signal. Par CLHP couplee a la spectrometrie de masse, nous avons pu separer des especes moleculaires reprimant le SSTT et qui sont contenues dans ce signal, mais l'identification precise necessite plus d'investigations. Dans un second temps, nous nous sommes interesses aux kynurenines produites par la bacterie. Nous avons confirme que P. aeruginosa produit des kynurenines et le gene kynA est le gene cle de la voie de synthese de ces metabolites. En utilisant des fusions transcriptionnnelles, nous avons montre que le tryptophane et la kynurenine regulent positivement la production des kynurenines en agissant sur l'expression des genes cles. D'autres parts, nous avons remarque que la bacterie module l'activite de la voie metabolique des kynurenines issue du tryptophane en fonction de son etat de croissance. Nous avons montre qu'au cours du dialogue interregne bacterie/hote, la voie des kynurenines de P. aeruginosa est stimulee par certains composants du systeme immunitaire. Grâce a un modele d'infection pulmonaire aigue, nous avons prouve que les kynurenines produites par la bacterie sont importantes pour sa virulence. Selon notre hypothese les kynurenines pourraient avoir une action sur la reponse immune, mais cela reste a determiner. Dans un troisieme temps, nous nous somme focalises sur la porine OprF. Nous avons montre que la mutation ∆oprF est a l'origine d'une alteration de la production mais vraisemblablement pas de la secretion des exotoxines du SSTT. Un ligand connu d'OprF, l'interferon gamma, module la voie des kynurenines. OprF pourrait donc avoir un role central dans les differents aspects de la regulation de la virulence. Nous avons donc produit des anticorps monoclonaux anti-OprF. Ces derniers se sont reveles capables de reconnaitre specifiquement la proteine OprF. Afin de verifier l'efficacite de ces anticorps, des experiences de neutralisation de la bacterie in vitro puis in vivo seront realisees. Mots cles : Pseudomonas aeruginosa, Systeme de Secretion de Type III, regulation, catabolisme du tryptophane, kynurenines, OprF. |
| File Format | PDF HTM / HTML |
| Alternate Webpage(s) | https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00682876/document |
| Language | English |
| Access Restriction | Open |
| Content Type | Text |
| Resource Type | Article |
