Efeito do kaempferol sobre o desenvolvimento in vitro de folículos ovarianos ovinos

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Santos, Jamile Maiara S.
Copyright Year	2018
Abstract	O objetivo deste estudo foi investigar o efeito do kaempferol sobre o cultivo in vitro de tecido ovariano e de foliculos secundarios isolados da especie ovina. Para isso, foram realizadas duas fases experimentais, divididas em dois capitulos. Para o cultivo de tecido ovariano (cultivo in situ - capitulo 1), os fragmentos de cortex foram cultivados por 7 dias em meio controle (α-MEM+) ou em α-MEM+ adicionado de diferentes concentracoes de kaempferol (0,1; 1; 10 ou 100 μM). O meio controle era constituido de α-MEM suplementado com insulina, transferrina, selenio, glutamina, hipoxantina, albumina serica bovina (BSA), penicilina e estreptomicina, chamado α-MEM+. Apos o cultivo, foram avaliados a morfologia, a ativacao, o crescimento e a fragmentacao do DNA dos foliculos pre-antrais. Alem disso, realizou-se a inibicao farmacologica da via fosfatidilinositol-3-fosfato (PI3k) e a imunohistoquimica para analise da expressao da proteina quinase B fosforilada (pAKT). No capitulo 2, os foliculos secundarios foram isolados e cultivados durante 12 dias em α-MEM suplementado com BSA, insulina, glutamina e hipoxantina (α-MEM: meio base sem antioxidantes) ou neste meio tambem adicionado por transferrina, selenio e acido ascorbico (AO: meio base com antioxidantes). Alem disso, foram adicionadas diferentes concentracoes de kaempferol (0,1; 1 ou 10 μM) aos diferentes meios de base: (α-MEM ou AO), totalizando 8 tratamentos. Apos o cultivo de foliculos isolados, os seguintes parâmetros foram avaliados: morfologia, formacao de antro, diâmetro folicular, percentagem de oocitos ≥ 110 μm, niveis de glutationa (GSH), atividade mitocondrial e percentagem de maturacao in vitro. No capitulo 1, 10 μM de kaempferol mostrou uma maior porcentagem de ativacao folicular e proliferacao celular do que os outros tratamentos (P 0,05) ao α-MEM suplementado com 1 ou 10 μM kaempferol. Alem disso, α-MEM mais 1 ou 10 μM de kaempferol e meio AO apresentaram diâmetros foliculares, ovocitos totalmente crescidos e niveis de GSH similares (P> 0,05). A formacao de antro foi maior (P 0,05) a α-MEM + 10 μM kaempferol. Alem disso, α-MEM suplementado com 1 μM de kaempferol apresentaram maiores (P 0,05). Em conclusao, 10 μM de kaempferol promove a ativacao, reduz a fragmentacao do DNA e aumenta a expressao de pAKT dos foliculos pre-antrais ovinos cultivados in situ. Ja para foliculos secundarios, 1 μM de kaempferol pode ser utilizado como unico antioxidante presente no meio base, substituindo a adicao de transferrina, selenio e acido ascorbico durante o cultivo in vitro e a retomada meiotica de oocitos oriundos de foliculos secundarios ovinos.
File Format	PDF HTM / HTML
Alternate Webpage(s)	http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/bitstream/tede2/8173/2/Jamile%20Maiara%20da%20Silva%20Santos.pdf
Language	English
Access Restriction	Open
Content Type	Text
Resource Type	Article