Estudio comparativo y evaluación de diferentes técnicas cromatográficas en el análisis de residuos de corticosteroides en muestras biológicas

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Hidalgo, Olga Huetos
Copyright Year	2012
Abstract	Se evalua el comportamiento cromatografico de los corticosteroides y se optimizan las condiciones adecuadas para la extraccion y purificacion en muestras biologicas. Se comparan distintos cartuchos de extraccion por fase solida (C18, Silica, OASIS, Bond Elut) con diferentes condiciones de lavado y elucion. Los mejores resultados se obtuvieron con cartuchos OASIS con recuperaciones por encima del 90%. Se realizo un estudio del disolvente con el cual se extraen mejor los corticosteroides, siendo el eter dietilico para pH 3 y 7 y el acetato de etilo para pH 11. Se llevo a cabo un estudio de separacion de los corticosteroides en diferentes columnas cromatograficas con variaciones en el pH, temperatura, composicion de la fase movil, etc, evaluando los Tr en funcion del Tr de la dexametasona. Los mejores resultados se obtuvieron con una columna Phenomenex Synergi Max RP 80A C12 a 40oC y con una columna NovaPak C18 (4.6 x 250mm) 4 mm, con una fase movil compuesta por acetonitrilo/agua (30/70),.El tiempo de incubacion de orinas, higado y rinon para la deconjugacion de los corticosteroides se optimizo en 24 horas para orina y 4 horas para tejidos, a pH 4.8 y a una temperatura de 37oC ± 2oC. Esta hidrolisis se realiza con la enzima Helix Pomatia. Los resultados de este estudio pueden ser aplicados al desarrollo de metodos analiticos. Se optimizaron tecnicas de deteccion como son HPTLC como metodo criba, HPLC y GC-MS como metodo de confirmacion para la deteccion de los corticosteroides. Para GC-MS se desarrollo un metodo de deteccion que incluye una derivatizacion con clorocromatopiridina. La deteccion, identificacion y cuantificacion de los residuos de los corticosteroides, se llevo a cabo con GC-MS en modo NCI, permitiendo la determinacion de los corticosteroides a niveles de 0.2 ppb para orina y 1 ppb para higado y rinon.
File Format	PDF HTM / HTML
Alternate Webpage(s)	https://eprints.ucm.es/5333/1/T27449.pdf
Language	English
Access Restriction	Open
Content Type	Text
Resource Type	Article