Contribution à l’étude des agrégats bifides : sélection, caractérisation, mécanisme et prévention du diabète de type 1

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Scuotto, Angelo
Copyright Year	2015
Abstract	Certaines souches de bifidobacteries entrent dans la composition de laits infantiles. Leurs proprietes (modulation du microbiome, regulation de la translocation bacterienne, maturation de cellules dendritiques) sont liees a la capacite de secretion de composes de haut poids moleculaire lors de la fermentation bacterienne. Les objectifs de ce travail sont, dans un premier temps, de caracteriser les molecules issues de la fermentation de la souche de reference B.breve C50, et de determiner si d’autres bifidobacteries peuvent secreter des molecules de proprietes similaires. Les analyses associant chromatographie gazeuse (GC), spectrometrie de masse (MS), electrophorese, sequencage proteique montrent que les composes fermentaires de B.breve C50 sont des agregats (>600kDa) associant des unites lipoproteiques de la paroi cellulaire contenant un domaine CHAP et des sucres, en majorite du glucose. Ces agregats sont reconnus par le TLR6, indiquant une structure lipoproteique di-acylee. Ils sont egalement ligand de la galectine 1, ce qui suggere que les hexosamines et le galactose detectes par GC sont exposes a l’exterieur des agregats. L’analyse in silico des homologies avec le gene codant pour la sequence proteique revele la proximite du gene de B.longum avec B.breve. Par contre, il est peu probable que B.bifidum secrete des agregats semblables, la sequence du gene homologue etant depourvu de lipobox. Les agregats (>600 kDa), isoles apres fermentation de la souche B.longum CBi0703 dans le milieu lacte de reference, montrent une composition similaire (unites lipoproteique associees a des sucres, en majorite du glucose et du mannose), une reconnaissance par la Galectine 1 mais non par le TLR6. La difference de composition en lipide et l’hydrophobicite de la sequence proteique semble prevenir la reconnaissance de la structure lipoproteique par le recepteur TLR6. Les agregats de B.longum ayant montre des proprietes anti-inflammatoires, l’hypothese d’une phagocytose a ete exploree dans un deuxieme temps. Les agregats marques par des marqueurs fluorescents ne sont pas detectes dans les cellules apres contact direct (ex-vivo) ou gavage des animaux (in vivo). Une capture des agregats par les cellules presentatrices d’antigenes est donc peu probable. La reconnaissance par la galectine 1 des deux types d’agregats bifides nous fait privilegier la piste d’un mecanisme de regulation de la translocation du microbiome par l’intermediaire des structures hexosamines et galactose exposees a la surface des agregats. Dans un troisieme temps, l’implication des agregats bifides dans la prevention du diabete de type 1 a ete exploree. En effet, le lait de femme previent la survenue du diabete chez les souris NOD. La recherche par PCR du gene codant pour la lipoproteine d’interet a permis la detection de B.longum dans 21 echantillons de lait maternel sur 33 (soit 12 mamans parmi 16). A l’inverse, B.breve est rarement isole (2 mamans parmi 16). Comme l’analyse transcriptomique indique que les lipoproteines sont synthetisees de facon continue, elles peuvent donc etre secretees par les bifidobacteries dans le lait de femme. Aussi le choix s’est porte sur les agregats de B.longum, testes a une dose anti-inflammatoire en prevention anti-diabetique. Si l’administration de lait maternel reduit l’incidence du DT1 chez des souris NOD âgees de plus de 18 semaines (p < 0.001), c’est au contraire une protection precoce mais qui ne persiste pas qui est observee sous agregats bifides. L’effet protecteur est observe en absence de bifidobacteries intestinales. Les agregats bifides a la dose anti-inflammatoire ne modulent pas a la meme vitesse les bacteries intestinales sensibles au lait de femme, ce qui pourrait expliquer le retard d’apparition des premiers diabetes lors du traitement.
File Format	PDF HTM / HTML
Alternate Webpage(s)	https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01266216/document
Language	English
Access Restriction	Open
Content Type	Text
Resource Type	Article