Caracterización del factor de splicing cwf15 y su relación con el procesamiento del ARNm y la inestabilidad genómica

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Martín, Félix Reyes Tallada, Victor A.
Copyright Year	2015
Abstract	Introduccion : Los danos en el ADN que no se reparan llevan a la senescencia celular, la apoptosis y a la generacion de tumores. Los R-loop son hibridos que de ADN:ARN que se forman cuando se producen problemas con la transcripcion o la replicacion del material genetico. Estos R-loops conducen inevitablemente a la formacion roturas de doble cadena (DBS) y, por ende, a la inestabilidad genomica. En los ultimos anos, se han identificado numerosos factores de procesamiento de ARN conservados evolutivamente que previenen la inestabilidad genomica mediada por la formacion de R-loop (Li y Manley, 2005; Santos-Pereira et al., 2014). En este proyecto fin de master se caracteriza, utilizando la levadura de fision Schizosaccharomyces pombe, un mutante en un factor asociado al spliceosoma, cwf15, que produce inestabilidad genomica asociada al metabolismo del ARNm. Metodos: Para el estudio de la funcion del gen cwf15 se aplicaron tecnicas celulares, moleculares y de microscopia confocal en celulas vivas a tiempo real y analisis geneticos para la caracterizacion del fenotipo mutante, asi como aproximaciones trascriptomicas para determinar que aspectos del procesamiento de ARN estan afectados. Resultados y conclusiones: Diversas interacciones geneticas negativas con factores de procesamiento de ARNm confirman que la proteina cwf15 esta implicada en splicing. Sin embargo, sorprendentemente, la perdida de funcion del gen provoca la incapacidad de elongacion del huso, un defecto especifico en la segregacion del material genetico esencial para el mantenimiento de la integridad genomica. La formacion de numerosos acumulos del marcador rad22 en el nucleo pueden apuntar a problemas de hiperrecominacion causados por un aumento de los danos en el ADN. Este aumento se reduce drasticamente por la sobrexpresion de la RNAsaH, lo que lleva a pensar que la causa molecular de la inestabilidad genomica es la formacion masiva de R-loops. Por otro lado, los datos de RNA-seq parecen indicar que existen defectos en la terminacion de la transcripcion, sugiriendo una novedosa conexion entre la maquinaria de splicing, o algunos de sus factores, y el procesamiento del extremo 3´del mRNA.
File Format	PDF HTM / HTML
Volume Number	1
Alternate Webpage(s)	https://www.upo.es/revistas/index.php/biosaia/article/download/1267/1069
Language	English
Access Restriction	Open
Content Type	Text
Resource Type	Article