Mesure De L'activité Protéolytique Au Niveau Pulmonairelors De L'infection Par Le Virus Du Syndromereproducteur Et Respiratoire Porcin

Content Provider	Semantic Scholar
Author	Girard, Manon
Copyright Year	2000
Abstract	On retrouve une fluctuation de la secretion de proteases extracellulaires dans diverses maladies inflammatoires chroniques et auto-immunitaires telles l'arthrite rhumatoide, le cancer, l'emphyseme pulmonaire, la fibrose kystique et l'asthme. Parmi les proteases les plus souvent secretees dans le milieu extracellulaire, on retrouve l'elastase des leucocytes, les cathepsines, la tryptase et la chymase des mastocytes, et les metalloproteases de la matrice (MMPs ). Ces enzymes sont secretees par des cellules myeloides et lymphoides majoritairement, bien que les MMPs puissent etre egalement secretees par des cellules stromales. Ces maladies degeneratives sont egalement caracterisees par une infiltration massive des tissus impliques par des cellules du systeme immunitaire, possiblement favorisee par le relargage des proteases extracellulaires. L'infection causee par le virus du syndrome reproducteur et respiratoire porcin (VSRRP), virus s'attaquant principalement aux macrophages alveolaires et ayant de forts impacts sur la production porcine qoise et mondiale, est elle aussi caracterisee par une infiltration massive de cellules monocytaires et lymphocytaires. Plus particulierement, cette infiltration se retrouve au niveau de l'interstice alveolaire, des zones perivasculaires et peribronchiolaires. Cette etude visait donc a etudier la variation de l'activite proteolytique nette dans les poumons de porcs infectes par le VSRRP. Pour ce faire, des porcelets âges de quatre semaines ont ete inocules par voie intratracheale avec une preparation de VSRRP ayant un titre infectieux evalue a 107DICT50/ml. Ensuite, les poumons de trois porcelets ont ete preleves pour chacun des jours post-infection choisis, soit les jours 3, 7, 14 et 42 post-infection (p.i.), afin d'effectuer sur ceux-ci des lavages bronchoalveolaires (BALs). Des echantillons de poumons, ainsi que de rates, de reins, de ganglions thoraciques et mesenteriques ont ete preleves pour fins de detection d'ARN viral par RT-PCR, d'isolement viral et d'analyses histologiques. Les resultats d'analyses par RT-PCR ont permis de demontrer la presence d'ARN viral dans les poumons des porcs infectes pour tous les jours post-infection, et que l'infection etait systemique du jour 3 p.i. au jour 14 p.i. inclusivement. L'isolement viral a demontre que l'infection etait maximale au jours 7 et 14 p.i. autant au niveau des poumons qu'au niveau de la rate, et que l'infection systemique (rate) etait terminee au jour 42 p.i. L'analyse de l'activite proteolytique nette s'est faite par l'utilisation de la technique de F ASC, qui permet de mesurer 1' activite proteolytique nette presente au niveau de divers fluides biologiques. Les resultats obtenus ont demontre que l'activite nette contenue dans les BALs, au niveau des poumons, augmentait de facon significative aux jours 7 et 14 p.i., et que cette augmentation d'activite proteolytique etait transitoire. L'analyse des BALs par zymographie (gel SDS-PAGE contenant un substrat integre) a revele que les gelatinases A et B (MMP-2 et MMP-9, respectivement), bien connues pour leur implication dans diverses maladies degeneratives, augmentaient egalement aux jours 7 et 14 p.i.. Les niveaux de MMP-2 et -9 seriques furent par contre stables, demontrant que le debalancement de 1' activite proteolytique induit par le virus est specifique aux poumons. L'analyse des lesions histologiques induites par l'infection par le VSRRP a permis de mettre au jour une correlation entre l'apparition des lesions et l'augmentation .. transitoire de la secretion de proteases extracellulaires et de MMP~. Ces resultats indiquent que la secretion des proteases extracellulaires au niveau des poumons peut egalement etre augmentee lors d'une infection virale, comme cela a ete demontre dans le cas des maladies degeneratives non-virales telles la fibrose kystique, l'asthme et l'emphyseme pulmonaire. Cette augmentation de l'activite proteolytique pourrait jouer un role preponderant dans la pathologie, notamment en favorisant un etat d'immunosuppression local et transitoire propice a l'etablissement d'agents infectieux opportunistes.
File Format	PDF HTM / HTML
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Language	English
Access Restriction	Open
Content Type	Text
Resource Type	Article